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食品中合成着色剂的测定SPE-HPLC法(GB 5009.35-2023)

发表时间:2023-10-08 09:17

方法优势:

GB 5009.35-2023与2016版相比,着色剂检测种类由7种增加至11种,同时基质种类也进行了扩充,前处理小柱由聚酰胺粉变更为PWAX或同等类型小柱。

纳鸥科技依据GB 5009.35-2023食品中合成着色剂的测定,采用Anavo PWAX-II固相萃取柱净化,提取方法简单、回收率高、净化效果优异、方法稳定性好。


1、标准品配制

(1) 单标储备液1000 ug/mL,称取适量色素单标,水配制成1000 ug/mL的单标储备液。

(2) 混标中间液50 ug/mL,分别吸取0.5 mL单标储备液1000 ug/mL于10 mL容量瓶中,用水定容至刻度,配制成50 ug/mL的混标中间液。


2、试样提取

2.1 液体类试样(饮料、调制乳等)、冷冻饮品(风味冰、冰棍类)

取 2g样品,置于50mL 具塞离心管中,加入25mL乙醇氨水溶液,涡旋1min,5000r/min离心5min,并用乙醇氨水溶液定容至50mL,即得提取液;准确吸取上清液10mL,50℃下氮气浓缩至3mL左右,分2次~3次共加入10mL 5%甲醇水溶液溶解,作为待净化液。


2.2 固体类试样(加工水果、酱及酱制品、香辛料等)

取2g样品,置于50mL 具塞离心管中,先加入适量水(2 mL~5 mL),50 ℃水浴加热混匀样品,加入25 mL 乙醇氨水溶液,涡旋1 min,50 ℃超声或振摇提取20min,8000r/min离心5min,取上清液置于50mL容量瓶中,每次加入约5mL~10mL乙醇氨水溶液重复提取操作至上清液无明显颜色,离心后合并上清液,用乙醇氨水溶液定容至50mL,即得提取液。准确吸取提取液10mL,50 ℃氮气浓缩至3mL 左右,分2次~3次共加入10mL5%甲醇水溶液溶解,作为待净化液。


2.3含油量较大的试样(可可制品、巧克力和巧克力制品等)

取2g样品,置于50mL具塞离心管中,加入20mL石油醚,涡旋1min,超声或振摇提取10min,8000r/min离心5min,弃去上清液,油脂含量较高的可重复提取一次,弃去上清液,加入 25 mL 乙醇氨水溶液,涡旋 1 min,50 ℃ 超 声提取20min,8000r/min离心5min,收集上清液置于50mL容量瓶中,按照2.2中“每次加入约5mL~10mL乙醇氨水溶液……作为待净化液”操作


3、净化

Anavo PWAX-ll 150 mg/6 mLPN:AN60A051)


4、分析条件

色谱柱:Origsil C18 250x4.6 mm5um(PN:AN80B001

流   速:1.0 mL/min   

进样量:10 μL   柱温:30

检测器:二极管阵列检测器波长范围:400nm~800nm,检测波长:415nm(柠檬黄、喹啉黄),520nm(新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、酸性红和赤藓红),610nm(靛蓝、亮蓝)。

流动相: A为20 mmol/L 乙酸铵溶液   B为甲醇梯度设置如下


5、添加回收结果

食品中人工合成着色剂的HPLC检测的添加回收结果。

添加浓度30 mg/kg(加标量:50 ug/mL,1.2 mL)

添加浓度3.0 mg/kg(加标量:50 ug/mL,0.12 mL)



回收率(%)












样品
果粒橙
果冻
乳饮料
糕点
火腿
茶叶






添加浓度(mg/kg)
30
3.0
30
3.0
30
3.0
30
3.0
30
3.0
30
3.0
柠檬黄
91.23
95.85
103.36
93.42
98.56
87.95
100.26
93.92
97.02
93.03
84.28
90.24
新红
98.56
96.22
100.24
97.35
104.02
95.79
99.46
96.84
100.35
93.75
81.02
82.31
苋菜红
99.12
92.43
105.23
96.28
103.65
93.04
98.59
94.87
99.34
91.96
80.24
81.92
靛蓝
90.25
104.36
93.26
102.38
100.01
110.47
90.47
100.64
89.47
86.47
34.57
40.47
喹啉黄1
97.34
102.92
103.37
104.48
104.35
99.35
93.36
98.58
100.47
88.58
63.47
65.37
胭脂红
86.37
98.34
86.37
98.43
102.31
92.46
83.47
97.47
98.69
92.68
84.89
82.48
日落黄
102.20
99.05
102.46
97.85
100.43
93.36
99.67
99.02
102.36
93.57
70.43
65.47
喹啉黄2
100.37
87.64
96.48
106.02
103.36
96.37
102.24
99.65
97.47
88.57
75.37
77.47
诱惑红
99.86
100.26
101.26
103.25
102.36
90.36
100.64
94.36
101.68
99.57
72.47
78.93
酸性红
93.02
92.27
90.26
95.95
101.36
96.13
90.37
85.37
98.58
93.47
89.58
93.78
亮蓝
101.25
90.17
100.26
90.27
103.52
95.36
98.67
95.47
103.46
96.08
72.73
78.37
喹啉黄3
102.23
85.37
102.37
103.48
99.58
93.46
98.32
104.57
98.57
104.37
88.73
83.68
喹啉黄4
103.42
97.14
102.36
92.17
104.98
97.36
97.58
100.47
104.27
88.47
75.27
90.38
赤藓红
96.42
93.42
93.52
93.83
89.47
78.47
86.36
80.47
96.46
83.47
85.38
88.47



谱图(略)

配套关键耗材




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