下篇来啦!为什么别人做的回收率总比我高?新颁布36项兽残标准!发表时间:2022-06-30 13:10 2022年5月19日,纳鸥科技公众号发布了文章《为什么别人做的36项兽残回收率总比我高?(上篇)》:对GB 31656.8-2021、GB 31658.17、GB 31656.13三个常用标准的样品前处理关键点和要点等进行了总结,收到了广大检测工作者的积极反响。 现将后续3个标准:GB 31658.5(氟苯尼考及氟苯尼考胺残留量)、GB 31658.2(氯霉素残留量)、GB 31656.11(土霉素、四环素、金霉素和多西环素残留量)的前处理关键点和要点整理出来,供各位老师参考。 GB 31658.5-2021前处理关键点和要点 动物性食品中氟苯尼考及氟苯尼考胺残留量的测定
原理 试料中残留的氟苯尼考与氟苯尼考胺,用碱化的乙酸乙酯提取,正己烷除脂,固相萃取柱净化,液相色谱-串联质谱法测定,内标法定量。 8.1 提取 称取试料2g(准确到±0.02g),于50 mL离心管中,加氘代氯霉素内标溶液100 μL,涡动混匀,静置15 min。加乙酸乙酯-氨水溶液10 mL,涡动1 min,3000 r/min离心5 min,取上清液于100 mL鸡心瓶中,残渣重复提取两次,合并3次提取液。鸡心瓶中加5%乙酸2 mL,振摇混匀,于40 ℃水浴中浓缩至1.5 mL。转至另50 mL离心管中,用5% 乙酸2 mL洗涤鸡心瓶,洗涤液转至同一离心管,加正己烷5 mL脱脂,涡动1 min,3000 r/min离心5 min弃上层,下层提取液重复脱脂一次,备用。 关键词:碱性条件下提取,提取3次 要点:
关键词:5%乙酸 要点:
8.2 净化 MCX 固相萃取柱依次用甲醇2 mL和水2 mL活化。备用液过柱,用5 %乙酸2 mL淋洗, 用10 %氨甲醇5 mL洗脱。收集洗脱液,于40 ℃氮气吹干。用30 %乙腈水溶液500 μL溶解残余物,滤膜过滤,供超高效液相色谱-串联质谱测定。 关键词:GB 31658.5-2021与GB/T 22959净化步骤区别 要点:
关键词: 5 mL氨甲醇洗脱,氮吹 要点: Tips:色谱柱或保护柱前加溶剂效应消除器(PN:AN80C037,谱宁科技),对于氟苯尼考和氟苯尼考胺检测限和定量限比较高的药物,5 mL氨甲醇洗脱后,可不经过氮吹,过滤膜后直接进行分析,不但可以满足检测要求,而且可以提高效率和目标物回收率,同时可以避免出现溶剂效应问题。(标准中氮吹的过程,一方面是为了浓缩样品,另一方面是为了转换溶剂,减少分析中出现的溶剂效应问题)。 注:溶剂效应消除器相关文章 发明专利:LC、LC/MS必备!改善峰形、提高柱效和分离度神器!(专利号:201510005647.8 ) 关键词:MCX固相萃取柱的特点和使用注意事项 要点:
GB 31658.2-2021前处理关键点和要点 动物性食品中氯霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 原理 试料中残留的氯霉素,采用间位氯霉素或氘代氯霉素作内标,依次用乙腈、4%氯化钠去蛋白,正己烷脱脂,乙酸乙酯提取,固相萃取柱净化,氮气吹干,液相色谱-串联质谱法测定,内标法定量。 8.1提取 取试料5 g(准确至±0.02 g),加内标工作液250 µL、乙腈5 mL、 4 %氯化钠溶液5 mL,涡旋振荡2 min,4 000 r/min离心10 min,取上清液,残渣重复提取1 次,合并上清液。加正己烷5 mL,涡旋振荡1 min,2 000 r/min离心10 min,弃去上层液,正己烷重复处理1次。加水饱和的乙酸乙酯溶液5 mL,涡旋振荡1 min,2 000 r/min离心10 min,上层液转移到15 mL离心管中,重复提取1次,合并提取液,氮气吹干,加水-乙腈(95:5)3 mL使溶解,备用。 关键词:动物组织中蛋白质、脂肪、杂质的去除 要点:
关键词:氮气吹干 要点:
关键词:加水饱和乙酸乙酯溶液反萃取 要点:
8.2净化 取固相萃取柱,依次用甲醇、水各10 mL预洗。备用液过柱,加水洗柱2次,每次3 mL, 加流动相4 mL,以1 mL/min速度洗脱,收集洗脱液。加水饱和乙酸乙酯溶液4 mL,涡旋振 荡1 min,2000 r/min离心5分钟,取上层液,重复处理1次,合并上层溶液,氮气吹干。加流动相1.0 mL使溶解,滤过,供液相色谱-串联质谱测定。 关键词:预洗 要点:
关键词:多步骤的萃取和反萃取 要点:
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